1.將放在蔗糖溶液中的組織塊取出，放入20g L-1 蔗糖與OCT包埋劑1：1體積比例混合液中，室溫浸泡2h
2. 移入OCT包埋劑中室溫浸泡4h，更換新的OCT包埋劑，室溫浸泡6h.
3. 將標本置于托物臺，用恒冷箱切片機切片（一般-22℃），片厚10μm，貼于預處理的載玻片上，-20℃冰箱保存。
OCT冰凍切片包埋劑是一種聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物，目前已廣泛用于免疫組化實驗室中，其用途是在冰凍切片時支撐組織，以增加組織的連續性，減少皺折及碎裂。
又因OCT混合物為水溶性，故在漂片時可溶于水，所以在以后的染色中不會增加背景染色。
利用OCT混合物（opti-mum cutting temperature compound）預先浸潤組織，然后再進行恒冷箱切片，使切片質量得到改善。
另外，皮膚疾病中反應在其病因發病機制中占很大比重，因此在皮膚活檢標本診斷中顯示抗原或抗體是很重要的，一般使用冰凍切片直接免疫熒光法觀察切片標本上熒光抗體染色結果作為抗原的鑒定和定位利用OCT混合物（opti-mum cutting temperature compound）預先浸潤組織，然后再進行恒冷箱切片，使切片質量得到改善
